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產(chǎn)品中心
螢火蟲螢光素酶報告基因檢測  探針與染色

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測 探針與染色

簡要描述:

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測 探針與染色 螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一種報告基因來研究基因調(diào)控和功能,以及用于藥物篩選。由于哺乳動物細胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性,螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報告子。

產(chǎn)品時間:2024-03-14

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Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒

產(chǎn)品標簽

Firefly Luciferase 螢火蟲熒光素酶Photinus pyralis;報告基因檢測;D-luciferin sodium D-熒光su鈉鹽;ATP生物發(fā)光檢測CAS:61970-00-1;

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

價格(元)

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒

MF4001-100T

100T

716

MF4001-1000T

1000T

3966

產(chǎn)品描述

螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)普遍用作一種報告基因來研究基因調(diào)控和功能,以及用于藥物篩選。由于哺乳動物細胞或組織缺乏任何內(nèi)源性的熒光素酶活性和生物發(fā)光的天然屬性,螢火蟲熒光素酶是一種非常靈敏的遺傳報告子。螢火蟲螢光素酶是一種分子量~61kD的蛋白,在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可以催化螢光素(Luciferin)氧化成氧化熒光素(Oxyluciferin),在此氧化過程中釋放出生物螢光(Bioluminescence)。這一熒光可通過化學發(fā)光儀(Luminometer)或液閃測定儀進行測定。

本螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒(Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit),正是利用螢光素為底物來檢測細胞內(nèi)螢火蟲螢光素酶活性的試劑盒,操作簡單、快速、靈敏且呈良好的線性關系。

產(chǎn)品組分

組分編號

組分名稱

產(chǎn)品貨號(規(guī)格)

MF4001-100T

MF4001-1000T

MF4001-A

Cell Culture Lysis Buffer細胞裂解液

60ml

10×60ml

MF4001-B

Luciferase Assay Reagent螢火蟲熒光素酶檢測試劑

10ml

10×10ml

保存與運輸方法

保存:細胞裂解液置于4℃保存三個月有效,-20℃保存一年有效;螢火蟲熒光素酶檢測試劑置于-20℃六個月有效,-80℃避光保存一年有效;

運輸:冰袋運輸。

注意事項

  • 為了保證螢火蟲熒光素酶檢測試劑的穩(wěn)定性,建議初次使用進行適當分裝,避光凍存,盡量降低反復凍融次數(shù)。內(nèi)部測試顯示反復凍融三次對測定結(jié)果無明顯影響。

  • 由于溫度對酶活性有影響,測定時樣品和試劑均需達到室溫后再進行測定。

  • 為取得加測定結(jié)果,用單管的化學發(fā)光儀測定時,樣品和試劑混合后到測定前的時間需盡量控制在相同時間,比如30s內(nèi);使用具化學發(fā)光測定功能的多功能熒光酶標儀時,hao xian把樣品全部加好,然后統(tǒng)一加入螢火蟲熒光素酶檢測試劑。

  • 樣品和試劑混合后,必須等待1~2s,再進行測定。測定時間通常為10s,根據(jù)情況可適當延長或縮短,但同一批樣品宜使用相同的測定時間。

  • 為避免由于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細胞效率差異引起的誤差,可同時轉(zhuǎn)入海腎熒光素酶報告基因質(zhì)粒作為內(nèi)參,用我司的雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒(貨號:MF4010-100T)進行檢測。

  • 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

一、 細胞裂解

1.1 將含轉(zhuǎn)染有報告基因質(zhì)粒的細胞內(nèi)的培養(yǎng)基去除,對于貼壁細胞直接加PBS輕輕洗滌,對于懸浮細胞,低速離心收集細胞后用PBS輕輕洗滌。

1.2 將細胞裂解液充分混勻后,按下表用量來加入適量細胞裂解液,之后將培養(yǎng)板放在微型振蕩器上室溫震蕩15min,以充分裂解細胞。

培養(yǎng)皿類型

96孔板

48孔板

24孔板

12孔板

6孔板

細胞裂解液(μl/孔)

100

150

200

300

500

注①】:如果熒光素酶的表達水平比較低,可嘗試使用更少的裂解液,例如6孔板的每孔用量可減少到100μl?!咀?/span>】:細胞裂解后可立即測定熒光素酶活,也可置于-70℃凍存,避免反復凍融,待以后再測定。凍存樣品需充分融解,達到室溫后再進行酶活測定。

1.3 將充分裂解后的產(chǎn)物于10,000~15,000rpm室溫離心3~5min,取上清用于測定。


二、 熒光素酶檢測

2.1 融解螢光素酶檢測試劑,并達到室溫。

2.2 按儀器說明書開啟化學發(fā)光儀或具有檢測化學發(fā)光功能的多功能酶標儀,設定參數(shù),測定間隔設為2s,測定時間設為10s。

2.3 將細胞裂解產(chǎn)物按照20~100μl的體積加入測量管中(如果裂解產(chǎn)物足夠,請加入100μl;如果裂解產(chǎn)物不足可以適當減少用量,但同批裂解產(chǎn)物的使用量宜保持*)。

2.4 加入100μl螢光素酶檢測試劑,用槍打勻或用其它適當方式混勻后測定RLU(Relative light unit)。以細胞裂解液為空白對照。

相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

MF4001-100T

Firefly Luciferase Reporter Gene Assay Kit 螢火蟲螢光素酶報告基因檢測

100T

MF4006-100T

Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit 海腎螢光素酶報告基因檢測

100T

MF4010-100T

Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit 雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒

100T

MX4602-100MG

D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光su鈉鹽

100mg

MX4603-100MG

D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素鉀鹽

100mg

MX4606-500UG

Coelenterazine Native 天然腔腸素

500μg

MX4608-500UG

Coelenterazine h 腔腸素h

500μg



— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】



上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承以人為本,以誠為信、合同守信"的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。


螢火蟲螢光素酶報告基因檢測  探針與染色

螢火蟲螢光素酶報告基因檢測  探針與染色


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