Polybrene（Hexadimethrine Bromide）聚凝胺（10mg/ml）

（基因轉(zhuǎn)染/病毒感染增強(qiáng)劑）

基本介紹：

Hexadimethrine Bromide，中文名海（地）美溴銨，CAS：28728-55-4，一種多聚陽(yáng)離子聚合物，海美溴銨能夠增強(qiáng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率，常常用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。比如，可轉(zhuǎn)染低分子量質(zhì)粒DNA進(jìn)入細(xì)胞系（如CHO），這種細(xì)胞用其他方法如磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染相對(duì)比較難。也常用于逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染。作用原理可能在于能夠中和細(xì)胞表面唾液酸與病毒顆粒之間的靜電排斥和增強(qiáng)受體不依賴的病毒吸收，來(lái)增強(qiáng)病毒的感染效率。

基本特性：

1）CAS：28728-55-4

2）同義名：Hexadimethrine Bromide; 1,5-Dimethyl-1,5-diazaundecamethylene polymethobromide;

3）純度：≥94% (titration)

4）濃度:10mg/ml in H₂O，無(wú)菌

5）化學(xué)結(jié)構(gòu)：

常見(jiàn)篩選濃度：

Polybrene（聚凝胺）是海（地）美溴銨（Hexadimethrine Bromide）液體制品的商標(biāo)名，是一種非常有效的基因轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑。用于病毒介導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用濃度為8µg/ml，具體濃度依細(xì)胞類型會(huì)有差異，可參閱文獻(xiàn)或梯度實(shí)驗(yàn)摸索。

Polybrene用于轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑，已經(jīng)成為各大實(shí)驗(yàn)室和各種基因轉(zhuǎn)染服務(wù)機(jī)構(gòu)zui通用的方法之一，相比于硫酸魚精蛋白（Protamine sulfate，CAS：98001-69-5）和其他陽(yáng)離子的使用普遍率更高更廣泛。發(fā)表的文獻(xiàn)至少上萬(wàn)篇。

參考使用濃度【文獻(xiàn)來(lái)源】：

1）用表達(dá)H-rasV12或小鼠Trop2基因的慢病毒感染新鮮制備的小鼠皮膚角質(zhì)細(xì)胞（Keratinocytes），使用

含4 μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育48h。之后收集細(xì)胞。

文獻(xiàn)：Wang J, et al. Loss of Trop2 Promotes Carcinogenesis and Features of Epithelial to Mesenchymal Transition in Squamous Cell Carcinoma. Mol Cancer Res. 2011 Dec;9(12):1686-95.

2）用ATF3 shRNA慢病毒顆粒感染6孔板培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞，加入含10 μg/ml polybrene的培養(yǎng)基孵育

24h，polybrene用來(lái)增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。用嘌呤霉素（10μM）篩選陽(yáng)性轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞株。

文獻(xiàn)：Weng S, et al. Niclosamide induced cell apoptosis via upregulation of ATF3 and activation of PERK in Hepatocellular carcinoma cells. BMC Gastroenterol. 2016 Feb 25;16:25.

3）用TLR10 shRNA慢病毒顆粒感染THP-1細(xì)胞，細(xì)胞先于polybrene（8 μg/ml）混合后，將病毒加入細(xì)

胞，病毒感染復(fù)數(shù)（MOI）為10。24h之后更換不含polybrene的新鮮培養(yǎng)基。用嘌呤霉素（1 μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。

文獻(xiàn)：Le HV, et al. Stable Toll-Like Receptor 10 Knockdown in THP-1 Cells Reduces TLR-Ligand-Induced Proinflammatory Cytokine Expression. Int J Mol Sci. 2016 Jun 1;17(6).

4）為提高腺病毒轉(zhuǎn)染效率和LacZ轉(zhuǎn)基因表達(dá)，使用6μg/ml Polybrene處理病毒載體后轉(zhuǎn)入BHK-21細(xì)胞（MOI為100），轉(zhuǎn)染率提高到95%，沒(méi)有用Polybrene處理的只有2.3%轉(zhuǎn)染率。

5）NPC細(xì)胞（50% confluence）用含5 μg/ml Polybrene的NBF培養(yǎng)基，之后用 ZNF804A shRNA慢病毒顆粒感染細(xì)胞；24h后，更換不含polybrene的NBF培養(yǎng)基。24-48h之后，加入嘌呤霉素（5 μg/ml）篩選陽(yáng)性克隆株。

文獻(xiàn)：Chen J, et al. ZNF804A Transcriptional Networks in Differentiating Neurons Derived from Induced Pluripotent Stem Cells of Human Origin. PLoS One. 2015 Apr 23;10(4):e0124597.

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Polybrene 聚凝胺（病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑）

Polybrene 聚凝胺（病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑）