CFDA, SE細(xì)胞增殖示蹤熒光探針

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

CFDA, SE (CFSE)；Calcein AM鈣黃綠素；活細(xì)胞染色探針；Fluorescein diacetate (FDA)；PKH26；CAS NO：150347-59-4；

產(chǎn)品信息

【溫馨提示】：見(jiàn)我司懋康生物（maokangbio）提供的CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒（#MX3010-500T）。

產(chǎn)品描述

CFDA, SE，英文全名5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester，CAS NO. 150347-59-4，是一種穩(wěn)定的、細(xì)胞膜滲透性的非熒光染料，由兩個(gè)醋酸基團(tuán)和一個(gè)琥珀酰亞胺酯（SE）官能團(tuán)組成的一個(gè)熒光分子。一旦主動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞，其醋酸基團(tuán)被胞內(nèi)酯酶切割，生成熒光素酯CFSE。CFSE具有高度熒光，且能通過(guò)其琥珀酰亞胺酯基團(tuán)共價(jià)結(jié)合到細(xì)胞內(nèi)的蛋白氨基基團(tuán)。正是這個(gè)共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)，CFSE能夠極其長(zhǎng)期的保留在細(xì)胞內(nèi)，長(zhǎng)達(dá)數(shù)個(gè)月。另外，歸因于這一穩(wěn)定連接，一旦染料進(jìn)入細(xì)胞，不會(huì)轉(zhuǎn)移到鄰近細(xì)胞。無(wú)活力細(xì)胞仍然是非熒光。而活細(xì)胞一旦分化，CFSE能夠很均勻的分散到子細(xì)胞中，每分裂一次子代細(xì)胞約能得到親本細(xì)胞1/2的熒光強(qiáng)度，因此，通過(guò)流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度的檢測(cè)，能夠依次分選出未分裂細(xì)胞，分裂一次的細(xì)胞（1/2熒光強(qiáng)度），分裂兩次的細(xì)胞（1/4熒光強(qiáng)度），分裂三次的細(xì)胞（1/8熒光強(qiáng)度），以及以此類(lèi)推其他分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSE可以檢測(cè)分裂多達(dá)8次或更多次數(shù)的細(xì)胞增殖。

CFSE廣泛用于細(xì)胞增殖和體內(nèi)細(xì)胞示蹤研究。CFSE的zui大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為492nm和517nm，標(biāo)記細(xì)胞后呈綠色熒光。使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)可用FL1檢測(cè)通道。也能用熒光顯微鏡觀(guān)察，使用FITC濾片。

產(chǎn)品特性

1）   CAS NO.：150347-59-4

2）   化學(xué)名：3',6'-bis(acetyloxy)-3-oxo-2,5-dioxo-1-pyrrolidinyl ester-spiro[isobenzofuran-1(3H),9'-[9H]xanthene] -ar-carboxylic acid

3）   同義名：5(6)-Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester, 5(6)-CFDA N-succinmidyl ester, CFDA-SE

4）   分子式：C₂₉H₁₉NO₁₁

5）   分子量：557.46

6）   純度：≥94%（HPLC）

7）   Ex/Em：492/517nm

8）   外觀(guān)：近乎白色至黃色粉末或結(jié)晶

9）   溶解性：溶于DMSO，DMF

10）化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

使用方法【詳見(jiàn)懋康內(nèi)容maokangbio】

1.       儲(chǔ)存液制備

將低溫保存的凍干粉產(chǎn)品置于室溫回溫至少20min，之后短暫低速離心，讓所有粉末都掉落至管底。稱(chēng)取適量粉末用高質(zhì)量無(wú)水DMSO溶解配制10mM儲(chǔ)存液。比如5mg CFDA, SE（Mw: 557.46）用897μl DMSO充分溶解即得到10mM儲(chǔ)存液。根據(jù)單次用量分裝，置于≤-20℃避光干燥保存，避免反復(fù)凍融。儲(chǔ)存液建議是一個(gè)月內(nèi)用完，zui多不超過(guò)三個(gè)月。

2.       工作液制備

3.       染色步驟

此染色步驟僅做指導(dǎo)，具體實(shí)驗(yàn)步驟可根據(jù)實(shí)際情況來(lái)做適當(dāng)調(diào)整。

注意事項(xiàng)

為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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