Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
簡要描述:
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提,一種源于粘質沙lei氏菌(Serratia Marcescen,又稱為靈桿菌)的非特異性核酸內切酶,由兩個*一樣的亞基構成,每個亞基大約30kDa,含有245個氨基酸和兩個必需的二硫鍵??梢郧懈詈徒到飧鞣N形式的DNA和RNA(單鏈,雙鏈,線性,環(huán)狀,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5個寡核苷酸殘基片段,并且在很多種操作條件下有效。
產品時間:2024-03-26
Benzonase Nuclease 全能核酸酶/廣譜核酸酶
(酵母重組表達,無細菌內毒素殘留,無蛋白酶污染)
產品關鍵詞:
Benzonase Nuclease 全能核酸酶(廣譜核酸酶);粘質沙lei氏菌(Serratia Marcescen);非特異性核酸內切酶;RIPA裂解液;DNA/RNA降解;CAS:9025-65-4;
基本描述:
Benzonase,中文名全能核酸酶,或廣譜核酸酶,一種源于粘質沙lei氏菌(Serratia Marcescen,又稱為靈桿菌)的非特異性核酸內切酶,由兩個*一樣的亞基構成,每個亞基大約30kDa,含有245個氨基酸和兩個必需的二硫鍵??梢郧懈詈徒到飧鞣N形式的DNA和RNA(單鏈,雙鏈,線性,環(huán)狀,或超螺旋形式),生成含有5’-磷酸末端的3-5個寡核苷酸殘基片段,并且在很多種操作條件下有效。對核酸堿基序列無特異性要求,可在鏈內任意核苷酸間進行切割,廣泛用于去除生物制品中的核酸。
主要應用:
1、科研研究中,作為培養(yǎng)細胞上清和細胞裂解液去粘度的*酶制劑,去除核酸干擾提高后續(xù)蛋白純化或功能研究;
需求背景:進行重組蛋白純化或者天然蛋白提取研究中,*步就需要用細胞/組織裂解液如RIPA對其進行裂解釋放蛋白,此時往往伴隨著大量的基因組DNA被釋放出來,很多并不是獨立存在的,往往與核蛋白以復合物的形式存在,導致提取物非常粘稠,呈鼻涕狀。蛋白提取過程中若不能很好處理這些粘稠基因組,會造成蛋白提取效率的降低極核蛋白的丟失。傳統(tǒng)方法有采用超聲處理,DNase/RNase消化來降低或消除核酸影響,但由于操作的非標準化,通常難以評估此核酸清除步驟的有效性和數據穩(wěn)定性。
此時,若在加裂解液的同時加入一定量的Benzonase Nuclease全能核酸酶(廣譜核酸酶),可以很好的清除粗提物中的核酸,有效降低粘度【見圖1】,提高后續(xù)操作的效率。
圖1、細胞裂解液經Benonase處理和未處理的比較圖。左管是僅加RIPA裂解液所得的離心產物,可看到鼻涕狀粘稠物懸浮在管中;右管事加RIPA裂解液和Benonase共同處理所得的離心產物,可看到上清非常透明。
2、用在生化分析樣品制備— — ELISA、色譜分析、雙相電泳和足跡分析等過程,使用本品benonase處理含有核酸的蛋白樣品,可提高分辨率,以及提高回收率。
3、疫苗工業(yè)、蛋白和多糖類制藥工業(yè),去除宿主核酸殘留,使得疫苗和蛋白類核酸污染顯著降低至皮克級別,提供生物功效。
4、防止細胞凝聚(Cell clumping),特別是融化凍存的細胞樣品時;
應用優(yōu)勢:Benonase不僅無蛋白酶活性,而且不會對健康細胞的生長造成干擾。
應用背景:全血來源的外周血單個核細胞(PBMCs)在疫苗研究中具有重要的應用價值,比如,定量疫苗誘導的T細胞反應。T細胞反應實驗zui初要求新鮮分離的細胞從而達到zui加的檢測信號,這給大規(guī)模的實驗中對樣本處理提出嚴格的操作限制。然而,凍存PBMCs(尤其是從凍存血液中分離出的PBMCs)一旦融化非常容易聚集到一起,影響后續(xù)的分析。
應用示例:Smith JG et al.研究顯示Benonase(≥50 U/ml)加入PBMC融化緩沖液中有效預防細胞凝聚,從而使得PBMC冷凍保存的應用成為可能?!疚墨I來源:Smith JG et al.Development and validation of a gamma interferon ELISPOT assay for quantitation of cellular immune responses to varicella-zoster virus. Clin Diagn Lab Immunol. 2001 Sep;8(5):871-9.】
Fig. 2. Comparison of results with frozen PBMCs isolated from freshly collected blood versus blood stored overnight (4°C). SFC represent the adjusted VZV ELISPOT response, i.e., the mean response to VZV antigen for replicate wells minus the mean response to MRC-5 control antigen for replicate wells.
產品優(yōu)勢:
1、酵母重組表達,無細菌內毒素殘留?!敬蟛糠稚虡I(yè)化的Benonase都是大腸桿菌重組表達,由于自身菌株特性,不管純化方法如何,或多或少都會受細菌內毒素影響。】
2、無蛋白酶殘留,不會對蛋白本身造成干擾,影響測試結果準確性。
3、比活力高≥1.0×106U/mg蛋白【活性單位定義:在37℃,pH8.0反應條件,2.625ml反應體系中,30min內使△A260吸收值變化1.0(相當于*消化37μg鮭魚精DNA成為寡核苷酸)所用的酶量定義為一個活性單位(U)】
4、提供兩種純度的產品:≥ 90%(SDS-PAGE),以及≥ 99%(SDS-PAGE),前者滿足zui基本的科研應用,價格更經濟實惠;后者滿足生物制品要求。
5、酶活性值:≥250 U/μL。對于小體積制備物,可用稀釋緩沖液20mM Tris-Cl pH8.0, 2mM MgCl2, 2mM NaCl稀釋到一定濃度,再加入體系中。稀釋后溶液可4℃保存幾天維持穩(wěn)定。
6、液體酶形式提供,使用更方便。直接加入裂解液共同使用即可。
產品訂購:更大包裝或產品技術問題,請來電/在線咨詢,:。。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | CAS NO. | 價格(元) | 貨期 |
MP1509-25KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 25KU | 9025-65-4 | 400 | 現(xiàn)貨 |
MP1509-50KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 50KU | 9025-65-4 | 720 | 現(xiàn)貨 |
MP1509-100KU | Benzonase Nuclease 全能核酸酶 | 100KU | 9025-65-4 | 1380 | 現(xiàn)貨 |
【懋康精品,能大量供貨,且能提供凍干粉特殊包裝,咨詢?!?/strong>
我司提供的Benzonase,比Merck、Sigma同等類型的產品性價比高很多,且基本有現(xiàn)貨,見下:
品牌/名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 濃度 | 價格(元) |
Merck(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | 70746-3 | 10KU | 25 U/μL | 1670 |
Merck(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | 71205-3 | 25KU | 250 U/μL | 2530 |
Sigma(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | E1014 | 5KU | ≥250 U/μL | 643 |
Sigma(Benzonase Nuclease,純度>90%,E. Coli) | E1014 | 25KU | ≥250 U/μL | 2254 |
【注】:Benzonase is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
相關產品:更大包裝或產品技術問題,請來電/在線咨詢,:。。
貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) | 貨期 |
MP1501-100ML | RIPA Lysis Buffer (Strong) RIPA裂解液(強) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1502-100ML | RIPA Lysis Buffer (Medium) RIPA裂解液(中) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1503-100ML | RIPA Lysis Buffer (Weak) RIPA裂解液(弱) | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1504-100ML | Lysis Buffer for WB/IP Assays 免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1505-100ML | NP-40 Lysis Buffer NP-40裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
MP1506-100ML | SDS Lysis Buffer SDS裂解液 | 100ml | 225 | 現(xiàn)貨 |
常見問題(FAQs): 詳見懋康內容。
問1:在實驗的哪一步加入Benzonase全能核酸酶? |
問2:如何稀釋Benzonase全能核酸酶? |
問3:Benzonase全能核酸酶是否無蛋白酶活性? |
問4:Benzonase全能核酸酶是否安全? |
問5:為什么Benzonase全能核酸酶不工作?什么會抑制其活性? |
問6:發(fā)現(xiàn)Benzonase全能核酸酶活性喪失,為什么? |
問7:一不小心將Benzonase全能核酸酶置于工作臺上整周,是否能繼續(xù)使用? |
問8:如何抑制Benzonase全能核酸酶活性? |
問9:如何去除體系中的Benzonase全能核酸酶? |
問10:Benzonase全能核酸酶與蛋白酶抑制劑cocktail兼容嗎? |
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
本產品僅能用作科研用途,不可他用。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作,主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產等領域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信"的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質產品。
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提
Benzonase 全能核酸酶蛋白抽提