iFluor 405 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 Actin熒光探針與細(xì)胞染色
簡要描述:
iFluor 405 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 Actin熒光探針與細(xì)胞染色,又稱鬼筆鵝膏素,Z初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中分離到的一種七肽毒素,以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin(聚合形式的肌動蛋白),不會結(jié)合單體肌動蛋白(G-actin)。
產(chǎn)品時間:2017-08-27
iFluor 405 Phalloidin iFluor 405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽
產(chǎn)品標(biāo)簽
Phalloidin 鬼筆環(huán)肽;F-actin 肌動蛋白(聚合);G-actin 球形肌動蛋白(單體);Actin Polymerization 肌動蛋白聚合;Cytochalasin細(xì)胞松弛素;CAS NO.:17466-45-4;
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
iFluor 405 Phalloidin iFluor 405標(biāo)記鬼筆環(huán)肽 | MX4409-300T | 300T | 1988 |
【溫馨提示】:見我司整理的鬼筆環(huán)肽及衍生物(Phalloidin and Phalloidin Conjugates)產(chǎn)品專題。
產(chǎn)品描述
鬼筆環(huán)肽(Phalloidin),又稱鬼筆鵝膏素,zui初是從毒蘑菇鬼筆鵝膏(Amanita phalloides)中分離到的一種七肽毒素,以*的親和力和特異性結(jié)合肌動蛋白絲F-actin(聚合形式的肌動蛋白),不會結(jié)合單體肌動蛋白(G-actin)。不像肌動蛋白抗體,同時識別單體和聚合形式的肌動蛋白。鬼筆環(huán)肽對大小纖維的親和力相近,在許多不同的動植物物種的肌肉和非肌肉細(xì)胞中,基本都按照一個肌動蛋白亞基與一個鬼筆環(huán)肽分子的化學(xué)計量比結(jié)合。不像肌動蛋白抗體,對不同物種或來源的肌動蛋白親和力會發(fā)生明顯變化。鬼筆環(huán)肽的非特異性結(jié)合幾乎可忽略,染色和未染色區(qū)域的差異極其明顯。鬼筆環(huán)肽使得肌動蛋白聚合/解離的臨界濃度降至1μg/ml,可用作一種聚合增強劑。另外,產(chǎn)生的復(fù)合物高度穩(wěn)定(解離常數(shù)約3×10–8 M),能夠抑制細(xì)胞松弛素、碘化鉀和溫度上升引起的去聚合和去組裝活性。
鬼筆環(huán)肽及其衍生物在納摩爾濃度即可對F-actin染色,且水溶性良好,是非常實用和方便的探針,對組織切片、細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系內(nèi)的F-actin進行定性和定量研究。另外,鬼筆環(huán)肽及其衍生物很小,直徑約12–15 Å,分子量<2000 Da,經(jīng)標(biāo)記后的F-actin仍維持許多標(biāo)記前的功能。比如,標(biāo)記的甘油抽提肌纖維仍能收縮;標(biāo)記的肌動蛋白絲仍能在固相肌球蛋白基質(zhì)中移動。
本品為iFluor 405熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽(iFluor 405-Phalloidin),以溶于DMSO的儲存液形式提供,按照100µl/孔(96孔板),總共可做300次。
產(chǎn)品特點
1)選擇性染色F-actin,優(yōu)于抗體染色法,具更高的特異性和更低的非特異背景。
2)優(yōu)秀的熒光亮度和穩(wěn)定性,類同于Alexa Fluor 405- Phalloidin,Ex/Em=400/421。
3)優(yōu)化用于固定和透化處理樣本。
4)適用于多重標(biāo)記應(yīng)用,與其他熒光染料包括熒光蛋白、Qdot熒光納米晶和其他包括二抗在內(nèi)的熒光偶聯(lián)物*兼容。
注意事項
1)本品具有一定的毒性,LD50=2mg/kg,操作時請注意防護。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
操作流程(免疫熒光染色)【詳見懋康整理】
有幾種方法都能用來染色組織細(xì)胞培養(yǎng)物內(nèi)的肌動蛋白絲(F-actin)染色,其中,固定步驟在獲得可信且具代表性的細(xì)胞F-actin分布情況中至關(guān)重要。固定步驟基于實驗自身需求來選擇。多聚甲醛或戊二醛都能得到優(yōu)秀的F-actin染色和良好的板狀偽足維持保存。
一、實驗材料準(zhǔn)備
二、染色工作液準(zhǔn)備
三、染色流程(以96孔板為例)
3.1 用黑框/透明底的96孔板進行細(xì)胞培養(yǎng),使其貼壁生長達到70-80%的匯合度。
3.2 吸掉培養(yǎng)液,用37℃預(yù)熱的1×PBS Buffer(pH 7.4)清洗細(xì)胞2次。
3.3 用溶于PBS的4%多聚甲醛固定細(xì)胞,室溫固定10-30min。【注意】:固定過程中甲醇能破壞肌動蛋白,因此,固定液中避免接觸任何甲醇。的固定液是無甲醇的甲醛。
3.4 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。
3.5 用破膜緩沖液透化細(xì)胞,室溫處理5min。
3.6 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。
3.7 取100μl 現(xiàn)配的iFluor 405 Phalloidin染色工作液到每個孔內(nèi),室溫避光孵育30-90min。
【注意】:若有需要,此時可加入即用型PI染色液或其他不同于iFluor 405熒光光譜的細(xì)胞核染色液。
3.8 用1×PBS Buffer清洗細(xì)胞2-3次,室溫下30s/次。
3.9 加抗熒光淬滅劑(如Fluoromount-GTM,Cat# MM1401)到孔內(nèi)保護熒光。
3.10 熒光顯微鏡下觀察染色結(jié)果,選擇iFluor 405激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=400/421nm)。若做細(xì)胞核染色,選擇合適濾片,比如PI激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=536/617nm)。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | Ex/Em | 分子量 |
MX4401-1MG | Phalloidin | 1mg | N/A | ~788.87 |
MX4402-1MG | Amino Phalloidin | 1mg | N/A | ~901.91 |
MX4403-300T | FITC Phalloidin | 300T | 492/518 | ~1100 |
MX4405-300T | TRITC Phalloidin | 300T | 546/575 | ~1000 |
MX4407-1MG | 5-TAMRA Phalloidin | 1mg | 546/575 | ~1200 |
MX4408-300T | iFluor™ 350 Phalloidin | 300T | 353/442 | ~1000 |
MX4409-300T | iFluor™ 405 Phalloidin | 300T | 400/421 | ~1400 |
MX4410-300T | iFluor™ 488 Phalloidin | 300T | 492/518 | ~1900 |
MX4411-300T | iFluor™ 555 Phalloidin | 300T | 556/574 | ~1300 |
MX4412-300T | iFluor™ 594 Phalloidin | 300T | 590/618 | ~1600 |
MX4413-300T | iFluor™ 647 Phalloidin | 300T | 650/665 | ~2200 |
MX4414-300T | iFluor™ 680 Phalloidin | 300T | 681/698 | ~2700 |
MX4415-300T | iFluor™ 790 Phalloidin | 300T | 787/808 | ~2800 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
iFluor 405 Phalloidin 鬼筆環(huán)肽 Actin熒光探針與細(xì)胞染色
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