鈣離子熒光探針系列是一種細(xì)胞膜電位敏感的親脂性陰離子熒光染料,鈣離子熒光探針系列本身無熒光,當(dāng)進(jìn)人細(xì)胞與胞漿內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合后才發(fā)出熒光,鈣離子熒光探針系列進(jìn)入細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度增加,即膜電位增加表示細(xì)胞去極化;反之,細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度降低即膜電位降低表示細(xì)胞超極化。鈣離子熒光探針系列是目前常用的線粒體膜電位檢測(cè)熒光探針
鈣離子熒光探針系列的工作原理
鈣離子熒光探針系列廣泛用于長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光鈣指示劑。其在506NM處被吸收,可以被氬離子激光的488nm激發(fā)光激發(fā),便于檢測(cè)。FLUO-3在沒有同鈣結(jié)合的情況下,無熒光產(chǎn)生。但是,在與鈣結(jié)合后,熒光(526nm)增強(qiáng)至少40倍。鈣離子熒光探針系列是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。鈣離子熒光探針系列的熒光非常弱,其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。鈣離子熒光探針系列進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-3,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。鈣離子熒光探針系列可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光,大激發(fā)波長(zhǎng)為506nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為526nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為488nm左右,發(fā)射波長(zhǎng)為525-530nm。